超高效液相色谱法 | 香兰素类添加剂的快速检测

超高效液相色谱法

香兰素类添加剂的快速检测

方案背景

香兰素具有浓烈的奶香味，是食品加工中经常使用的香味添加剂，广泛应用于食品和饮料中。食用香兰素类香精含量过多的食品可能导致不适，甚至损害身体健康。我国《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》(GB2760-2014) 中严格规定了较大婴儿和幼儿配方食品中香兰素的使用限量，并明确指出 0 – 6 个月婴幼儿配方食品中不得添加。因此，必须对婴幼儿配方食品中的香兰素类添加剂进行准确检测和严格控制。

现行《食品安全国家标准食品中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的测定》(GB 5009.284-2021) 中规定的香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素测定方法主要包括高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法和气相色谱-质谱法。使用国标第 一法高效液相色谱法时，甲基香兰素和乙基香兰素不易完全分离，影响定量结果的准确性。本文使用超高效液相色谱法 (UHPLC) 快速测定奶粉中的香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的含量，与国标第 一法相比，具有更好的分离度、分析速度更快、灵敏度更高。

安捷伦方案

色谱条件

• 色谱柱：Agilent Poroshell 120 CS-C18, 4.6 × 100 mm, 2.7 µm（部件号 695975-942）

• 柱温：30 ℃

• 进样量：5 μL

• 流速：2 mL/min

• DAD 检测器：检测波长 279 nm，参比波长 400 nm

• 流动相 A：0.5% 甲酸水溶液

• 流动相 B：乙腈

• 梯度洗脱程序：

样品前处理

实际样品参考 GB 5009.284-2021 中 5.1.2.1 的步骤进行处理，样品前处理流程图如下：

结果与讨论

标准品分析色谱图

四种标准物质在 Poroshell 120 CS-C18 色谱柱上获得了较好的保留和出色的分离效果，四个色谱峰种最小分离度可达 2.0 以上。

实际奶粉样品分析色谱图

实际样品经前处理后，四个目标化合物与基质均能完全分离，且运行时间只要 5 分钟，即可完成单个样品的分析，能明显提日常分析效率。

小结

本文展示了一种采用 Agilent 1290 Infinity II 超高效液相色谱系统和 Poroshell 120 CS-C18 (4.6 × 100 mm, 2.7 µm) 色谱柱，能够快速分析奶粉中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的含量的超高效液相方法。该方法分离效果好、分析速度快，灵敏度高，线性和重复性优异，可适用于婴幼儿奶粉中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的日常检测。